AHCC et son efficacité contre le VPH

Un nouveau traitement est l'AHCC® Papiloxyl. Le virus du papillome humain (VPH) se distingue comme l'infection sexuellement transmissible la plus répandue, se distinguant des virus tels que le VIH et le HSV (herpès). Sa forte incidence se reflète chez presque tous les hommes et femmes sexuellement actifs, qui finissent par le contracter à un moment donné de leur vie.

La plupart des personnes infectées par le VPH, hommes ou femmes , ne présentent aucun symptôme et l?infection a tendance à disparaître d?elle-même. Cependant, dans les cas où l'infection persiste, elle peut entraîner l'apparition de verrues/condylomes génitaux ou, dans des situations plus graves, de certains types de cancer.

Le VPH se transmet principalement par contact direct peau à peau lors de rapports sexuels oraux, vaginaux ou anaux non protégés avec une personne infectée. Elle ne se transmet pas par les fluides corporels tels que le sang ou le sperme.

Il est important de noter que, même si la plupart du temps, l?infection au VPH ne présente pas de symptômes visibles, la personne peut toujours en être porteuse et la transmettre à d?autres. Le risque de contracter l?infection augmente dans des situations telles que le début précoce des relations sexuelles, le fait d?avoir plusieurs partenaires sexuels ou le fait de ne pas utiliser régulièrement des préservatifs.

Chez les hommes, le VPH peut provoquer des lésions précancéreuses et un cancer du pénis, et chez les hommes homosexuels, il a également été associé au développement d'un cancer anal. De plus, des verrues génitales peuvent apparaître, comme chez la femme.

Le traitement contre le VPH vise à stimuler le système immunitaire afin qu?il puisse combattre l?infection. Les lésions causées par le virus peuvent être traitées par des procédures telles que la conisation du col de l'utérus ou des interventions chirurgicales en cas de cancer du col de l'utérus, du vagin ou de la vulve. Un nouveau traitement est l'AHCC® Papiloxyl .

Les principes actifs de l'AHCC sont des ingrédients présents dans de nombreux types de champignons et certains sont des dérivés d'alpha et de bêta-glucanes, des polysaccharides connus pour leur action bénéfique sur le système immunitaire. Ceux-ci produisent un effet modulateur sur le système immunitaire, augmentant la concentration de lymphocytes T et B, stimulant l'activité des macrophages, renforçant ainsi les défenses de l'organisme contre l'action des virus, bactéries, parasites ou cellules néoplasiques.

Le composé corrélé à l'hexose actif (AHCC) a fait l'objet de plus de 200 études cliniques menées principalement au Japon. Des recherches sont actuellement en cours dans plus de 150 centres de recherche et hôpitaux universitaires au Japon et aux États-Unis. Chaque année depuis 1994, plus de 300 médecins et chercheurs se réunissent à Sapporo, au Japon, pour le symposium de l'AHCC Research Association.

La possibilité de contracter à nouveau le VPH est présente, notamment dans les situations de système immunitaire déprimé. L?immunité acquise après la première infection n?est pas permanente et peut être affectée à différentes occasions. De plus, il est possible de contracter d?autres types de VPH, étant donné qu?il existe plus de 150 souches connues.

Le risque de développer un cancer associé au VPH varie en fonction du type de souche et de la localisation. Le VPH est responsable de 99,9 % des cas de cancer du col de l?utérus et peut également provoquer des cancers de l?anus et de la cavité oropharyngée. Cependant, les souches à haut risque oncologique sont moins fréquentes que les souches à faible risque, les types 16 et 18 se distinguant principalement.

Dans ces circonstances, l'importance de promouvoir l'éducation sexuelle parmi les jeunes est soulignée, ainsi que l'utilisation de méthodes préventives telles que les préservatifs, les digues buccales en latex et les vaccins. Il est également recommandé de renforcer le système immunitaire et de protéger les cellules des muqueuses et de la peau pour lutter contre les infections, en suivant toujours les instructions thérapeutiques du professionnel médical correspondant.

Le résultat de l'une des études cliniques menées avec Après avoir pris AHCC® pendant 6 mois, environ 60 % des patients infectés par le VPH à haut risque ont montré une résolution de l'infection. La supplémentation en AHCC® a également augmenté le nombre de lymphocytes T, ce qui indique que l'AHCC® peut éliminer le VPH en modulant l'immunité.

Papiloxyl est enregistré auprès de l'Agence espagnole de consommation, de sécurité alimentaire et de nutrition (AECOSAN) conformément à la réglementation en vigueur.

Article ESSAI CLINIQUE
Devant. Oncol., 22 juin 2022
Sec. Oncologie gynécologique
Tome 12 - 2022 | https://doi.org/10.3389/fonc.2022.881902
Supplémentation AHCC® pour soutenir la fonction immunitaire afin d'éliminer les infections persistantes à virus du papillome humain.

Objectif : Déterminer l'efficacité, la sécurité et la durabilité de l'utilisation de la supplémentation en AHCC pendant 6 mois pour soutenir le système immunitaire de l'hôte afin d'éliminer les infections à haut risque par le virus du papillome humain (VPH). Le supplément AHCC est un extrait exclusif et standardisé de mycéliums de lentinula edodes cultivés (AHCC®, Amino Up, Ltd., Sapporo, Japon) qui s'est avéré avoir des avantages immunomodulateurs uniques.

Conception de l'étude : Il s'agissait d'une étude randomisée, en double aveugle, contrôlée par placebo (CTN : NCT02405533) menée auprès de 50 femmes de plus de 30 ans présentant une infection persistante confirmée au VPH à haut risque depuis plus de 2 ans. Les patients ont été randomisés pour recevoir un placebo une fois par jour pendant 12 mois (N = 25) ou une supplémentation en AHCC de 3 g par voie orale une fois par jour à jeun pendant 6 mois, suivi de 6 mois de placebo (N = 25). Tous les 3 mois, les patients ont été évalués avec des tests d'ADN et d'ARN du VPH ainsi qu'un échantillon de sang prélevé pour évaluer un panel de marqueurs immunitaires, notamment l'interféron alpha, l'interféron bêta (IFN-?), l'interféron gamma (IFN-?). , IgG1, lymphocytes T et niveaux de cellules tueuses naturelles (NK). À la fin de la période d'étude de 12 mois, les patients du bras placebo ont eu la possibilité de poursuivre l'étude pour recevoir une supplémentation en AHCC sans insu pendant 6 mois avec les mêmes rendez-vous de suivi et les mêmes tests que le bras d'intervention.

Résultats : Cinquante femmes atteintes de VPH à haut risque ont été recrutées et 41 ont terminé l'étude. Quatorze (63,6 %) des 22 patients du groupe de supplémentation en AHCC étaient négatifs pour l'ARN du VPH/l'ADN du VPH après 6 mois, avec 64,3 % (9/14) obtenant une réponse durable définie comme étant négative pour l'ARN du VPH/l'ADN du VPH après 6 mois d'arrêt de la supplémentation. . Dans le groupe placebo, deux (10,5 %) des 19 patients étaient négatifs pour le VPH à 12 mois. Chez les douze patients du groupe placebo qui ont été choisis pour poursuivre l'étude sans insu, 50 % (n = 6) étaient négatifs pour l'ARN/ADN du VPH après 6 mois de supplémentation en AHCC. Au moment de la fin de l'étude, 34 patients au total (22 en aveugle et 12 sans aveugle) avaient reçu une supplémentation en AHCC avec un taux de réponse global de 58,8 % qui a éliminé les infections persistantes au VPH. Au moment du recrutement, le taux moyen d'IFN-? était de 60,5 ± 37,6 pg/ml chez les femmes présentant une infection persistante confirmée au VPH. La suppression de l'IFN-? à moins de 20 pg/ml était corrélée à une augmentation des lymphocytes T et de l'IFN-? et à une clairance durable des infections par le VPH chez les femmes ayant reçu une supplémentation en AHCC.

Conclusion : Les résultats de cette étude de phase II ont démontré que l'AHCC 3 g une fois par jour était efficace pour soutenir le système immunitaire de l'hôte afin d'éliminer les infections persistantes au VPH et qu'il était bien toléré sans aucun effet secondaire indésirable significatif signalé. La durée de la supplémentation en AHCC requise au-delà du premier résultat négatif nécessite une évaluation plus approfondie pour optimiser le succès et obtenir des résultats durables. La suppression du taux d'IFN-? à moins de 20 pg/ml est corrélée à la disparition des infections à HPV et mérite une évaluation plus approfondie en tant qu'outil clinique pour la surveillance des patients infectés par HPV.

Enregistrement des essais cliniques : clinictrials.gov/ct2/, identifiant NCT02405533

Introduction
Le virus du papillome humain (VPH) est classé comme un virus à ADN double brin non enveloppé qui infecte généralement la couche épithéliale des cellules, y compris les surfaces cutanées et muqueuses, et est associé à des verrues bénignes, des carcinomes in situ et des lésions malignes (1, 2 ). Il existe plus de 100 souches de VPH identifiées chez l'homme, 40 souches de VPH à faible risque (LR-HPV) associées aux verrues/lésions génitales et quinze souches de VPH à haut risque (HR-HPV) associées au cancer. Lorsque les infections à HR-HPV persistent dans le temps, les patients courent un risque accru de développer un cancer (3). Cependant, il convient de noter qu?une infection persistante au VPH à haut risque ne provoque pas le cancer en soi ; il s?agit plutôt d?un cofacteur contribuant au risque de développement d?un cancer lorsqu?il survient en combinaison avec d?autres agressions telles qu?une mauvaise alimentation, le tabagisme, le stress physiologique ou un dysfonctionnement/suppression immunitaire. Aux États-Unis, on estime à 85 890 le nombre de cas de cancer causés par des infections persistantes à haut risque au VPH, et on estime que 79 millions d?Américains sont aujourd?hui infectés par le VPH (4, 5).

Bien que la vaccination contre le VPH soit efficace dans la prévention des infections par le VPH, elle présente peu d?avantages pour le traitement des patients déjà infectés par le VPH (6). Il existe très peu d?options thérapeutiques efficaces pour éradiquer les infections à HPV à haut risque. L'objectif des modalités de traitement actuelles repose sur une détection précoce avec un dépistage systématique des frottis PAP, puis sur un traitement par le médecin utilisant la cryothérapie, l'excision chirurgicale, la procédure d'excision électrochirurgicale de l'anse (LEEP) ou la conisation au couteau froid. Ces procédures ont un taux de réponse plus élevé, de 80 à 100 %. Ce traitement local supprime la lésion, mais les patients auront fréquemment des lésions récurrentes. D'autres modalités de traitement utilisées pour le traitement du LR-HPV comprennent l'application topique de podophyllotoxine avec un taux de lésions récurrentes allant jusqu'à 40 % ou d'imiquimod avec une récidive d'environ 15 % (7, 8). À ce jour, il n?existe aucun traitement systémique efficace contre les infections persistantes à haut risque par le VPH.

L'AHCC est un extrait exclusif et standardisé de mycéliums de lentinula edodes cultivés (AHCC®, Amino Up, Ltd., Sapporo, Japon) qui a été développé au Japon en 1992 ; le composé est principalement composé de composants ?-glucane. Plusieurs études animales et humaines ont rapporté divers effets thérapeutiques, notamment des activités antioxydantes et anticancéreuses et une modulation du système immunitaire pour prévenir les processus infectieux des infections virales et bactériennes (9-14). Dans des études cliniques, l'AHCC a démontré l'avantage de réduire le risque d'infection et d'améliorer les symptômes des infections existantes (11).

Deux études pilotes ont été récemment menées sur des femmes qui présentaient un résultat positif persistant au VPH depuis plus de 2 ans, qui étaient par ailleurs en bonne santé et qui répondaient aux autres critères d'éligibilité (15). Dix femmes ont été inscrites à la première étude visant à évaluer l'efficacité d'une supplémentation en AHCC de 3 g par voie orale une fois par jour pour soutenir le système immunitaire de l'hôte afin d'éliminer les infections persistantes à haut risque par le VPH. Le régime a été répété mensuellement jusqu'à ce que le test du patient soit négatif pour le VPH ou jusqu'à ce que 6 mois de traitement actif se soient écoulés. Les patients testés positifs après 6 mois de traitement ont été considérés comme un échec thérapeutique. Les tests HPV et le dépistage par panel de marqueurs immunitaires ont été effectués une fois par mois pour surveiller l'élimination des infections persistantes à HPV à haut risque. Il y a eu une réponse encourageante chez 4 patients sur 8 (50 %) avec une éradication confirmée de l?ADN HR-HPV après au moins 3 mois et jusqu?à 6 mois de supplémentation quotidienne de 3 g d?AHCC (15). Dans la deuxième étude pilote avec une supplémentation de 1 g d'AHCC une fois par jour, une réponse similaire a été observée chez 4 patients sur 9 (44 %) avec une disparition confirmée des infections persistantes à haut risque par le VPH après 7 mois de supplémentation (15). Ces résultats de deux études pilotes confirment les conclusions précliniques précédentes selon lesquelles la supplémentation en AHCC a le potentiel d'être efficace pour aider le système immunitaire de l'hôte à éliminer les infections persistantes à haut risque par le VPH et soutiennent la justification de poursuivre une évaluation formelle de phase II pour confirmer ces résultats. conclusions préliminaires (16).

Matériels et méthodes
Étudier le design
Il s'agissait d'une étude de phase II randomisée, en double aveugle et contrôlée par placebo avec AHCC post-étude sans insu (Figure 1) qui a été examinée et approuvée par le comité d'examen institutionnel du Centre des sciences de la santé de l'Université du Texas HSC-MS14-0866/NCT02405533. L'étude a été menée chez des femmes de plus de 30 ans présentant des infections à HPV persistantes à haut risque documentées depuis plus de 2 ans ou plus, avaient des valeurs de laboratoire toutes dans les limites normales, avaient une histologie normale jusqu'à une néoplasie intra-épithéliale cervicale 2 (CIN2). tel que documenté par les dossiers du gynécologue principal et jugé par ailleurs sain. Des informations démographiques sur les patientes ont été collectées, notamment le nombre de partenaires sexuels à vie, les méthodes de contraception et les tests de grossesse périodiques tout au long de l'étude. L'AHCC et le placebo correspondant ont été généreusement fournis par Amino Up, Ltd. (Sapporo, Japon).

Figure 1
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FIGURE 1 Conception de l'étude pour le recrutement des patients. Ce schéma explique comment les patients ont été randomisés et l'étendue du suivi en fonction de la réponse du virus du papillome humain (VPH) à 12 mois.

Une fois l'éligibilité confirmée sur la base des critères du tableau 1, les patients ont fourni un consentement éclairé signé et ont été randomisés de manière équitable via une plate-forme informatique entre les deux groupes d'étude, de sorte qu'après le recrutement de 30 patients, il y avait 15 patients dans chaque bras et à la fin de l'étude. Lors du recrutement de l'étude, il y avait 25 patients dans chaque bras. Le groupe 1 a servi de bras d'intervention et a reçu une supplémentation en AHCC de 3 g par voie orale à jeun une fois par jour pendant 6 mois, suivi de 6 mois de placebo par voie orale à jeun. Le but des 6 mois de placebo dans le groupe 1 était de faciliter le maintien de la mise en aveugle pendant les 12 mois de l'étude. Le groupe 2 a servi de bras témoin et a reçu un placebo par voie orale à jeun pendant 12 mois.

Les patients ont été surveillés une fois tous les 3 mois au cours de l'étude avec une visite à la clinique pour examiner le journal de la pilule afin d'évaluer l'observance, d'évaluer toute toxicité ressentie au cours des 90 jours précédents et de collecter des échantillons de VPH via un écouvillon/brosse cervical et un échantillon de sang périphérique. L'insu de l'étude a été levé à 12 mois pour déterminer le statut HPV et les résultats des marqueurs immunitaires et révéler les affectations des groupes d'étude. Tous les patients ayant reçu l'AHCC et qui étaient négatifs pour le VPH à 12 mois ont été suivis pendant 6 mois supplémentaires (pour un total de 12 mois de surveillance après la fin de la supplémentation en AHCC). À 12 mois, si les patients du groupe témoin sous placebo étaient toujours positifs au VPH, il était alors proposé aux patients de continuer le traitement par AHCC sans insu pour obtenir plus d'informations sur sa toxicité et son efficacité. Le but du « crossover » après la levée de l'aveugle était également de contribuer à améliorer le recrutement et l'inscription puisque l'AHCC est un supplément nutritionnel facilement disponible.

Le principal résultat de cet essai était d'évaluer l'élimination de l'infection persistante à haut risque par le VPH, déterminée par les résultats négatifs des tests d'ADN du VPH obtenus lors de la réception d'une supplémentation en AHCC et maintenue pendant 3, 6 et 12 mois après la fin de la supplémentation en AHCC, par rapport à la réception d'une supplémentation en AHCC. placebo. À 12 mois, après avoir reçu une supplémentation en AHCC pendant 6 mois, si les patients étaient toujours positifs à l'ADN du VPH, cela était considéré comme un échec du traitement ou une absence de réponse (NR), et ils quittaient l'étude. En cas de résultat négatif après 6 mois de supplémentation en AHCC et 6 mois de placebo, les patients ont continué l'étude pendant 6 mois supplémentaires (deux visites) pour confirmer qu'ils restaient négatifs pour le VPH et pour évaluer la durabilité de la réponse. Une réponse complète (RC) a été définie comme les patients qui étaient négatifs pour l'ARN du VPH et l'ADN du VPH au moment de la fin de la supplémentation en AHCC et qui sont restés négatifs pour l'ARN du VPH et l'ADN du VPH tout au long des 12 mois de suivi de la supplémentation en AHCC. Une réponse partielle (PR) a été définie comme les patients qui étaient négatifs pour l'ARN du VPH et l'ADN du VPH au moment de la fin de la supplémentation en AHCC, mais qui ont ensuite été testés positifs pour l'ARN du VPH ou l'ADN du VPH lors d'une ou plusieurs visites au cours des 12 mois de suivi. hors supplémentation AHCC. Le groupe 2 a servi de contrôle pour tous les moments pendant toute la durée de l'étude. Des données de sécurité et d'efficacité ont été collectées chez les patients qui ont choisi de poursuivre la supplémentation en AHCC sans insu pendant 6 mois.

Collecte et traitement des échantillons
À chaque visite, un échantillon gynécologique (paroi cervicale ou vaginale) a été prélevé par trois méthodes (brosse cytologique, balai cytologique et spatule cervicale) pour garantir un échantillon adéquat et transféré dans un flacon d'échantillon gynécologique liquide ThinPrep® (Hologic, Inc., Marlborough, MA, États-Unis). Douze millilitres de sang total ont été collectés dans des tubes EDTA (BD Biosciences, San Jose, CA, USA) auprès de tous les patients à chaque visite. Tous les échantillons de sang ont été centrifugés à 1 500 tr/min pendant 10 minutes et les échantillons de plasma ont été séparés et conservés à -80 °C dans les 6 heures suivant le prélèvement jusqu'à leur utilisation ultérieure. Les cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) ont été isolées du sang restant par centrifugation sur gradient de densité sur un milieu de séparation des lymphocytes Ficoll (Lonza, Bâle, Suisse) en utilisant le protocole du fabricant. Les PBMC ont été cryoconservées dans un milieu de congélation contenant 90 % de sérum bovin f?tal (FBS) et 10 % de diméthylsulfoxyde (DMSO) dans de l'azote liquide (-196 °C) jusqu'à leur utilisation ultérieure. Le FBS a été acheté auprès de GIBCO Invitrogen Co. (Carlsbad, CA, USA). Le DMSO a été acheté auprès de Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA).

Analyse d?échantillons de virus du papillome humain
Les échantillons de VPH ont été initialement évalués avec des tests d'ARN du VPH E6/E7 (APTIMA, Hologic, Marlborough, MA, États-Unis) au laboratoire de pathologie moléculaire de l'UTHealth McGovern Medical School. Les résultats négatifs pour l'ARN du VPH ont été confirmés par le test COBAS ADN du VPH (Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ, États-Unis) au laboratoire méthodiste de pathologie moléculaire pour détecter la présence d'ADN du VPH et exclure les infections latentes au VPH.

Tests de marqueurs immunitaires et de cellules tueuses naturelles
Des kits ELISA sandwich prêts à l'emploi pour la détection de l'interféron alpha et bêta humain ont été achetés auprès de R&D Systems (Minneapolis, MN, USA). Les kits ELISA d'interféron gamma humain (IFN-?) et IgG1 ont été achetés auprès d'Affymetrix eBioscience (San Diego, Californie, États-Unis). Des ELISA sandwich pour la détection des IgG1 totales, de l'interféron alpha, de l'interféron bêta et de l'interféron gamma ont été réalisés conformément au protocole du fabricant. Pour chaque série de déterminations de marqueurs immunitaires, une courbe standard a été construite avec des concentrations connues de ces marqueurs fournies avec les kits. Les concentrations plasmatiques de ces marqueurs immunitaires à chaque instant ont été calculées à partir de graphiques standard et comparées aux concentrations de base.

Cinq anticorps anti-humains de souris ont été utilisés pour l'identification et la quantification des cellules tueuses naturelles humaines (cellules NK) : clone CD56 APC, B159 ; Clone CD3 PerCP-Cy5.5, UCHT1 ; Clone CD2PE, RPA 2.10 ; Clone CD7 FITC, M-T701 ; et clone CD45 APC-H7, 2D1. Tous les anticorps et les solutions de lyse de tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) ont été achetés auprès de BD Biosciences (San Jose, CA, USA). Pour l'analyse par cytométrie en flux des cellules NK humaines, les PBMC cryoconservées à chaque instant ont été décongelées doucement et centrifugées avec 5 ml d'un milieu complet à 1 500 tr/min pendant 5 min à 4 °C. Les culots cellulaires ont été remis en suspension dans 100 µl de tampon FACS (solution saline tamponnée au phosphate (PBS) avec 5 % de FBS). Pour la coloration des cellules, un ensemble de cellules de chaque échantillon a été incubé avec 5 µl de CD45 APC, et le deuxième ensemble de cellules a été incubé avec 50 µl d'un cocktail de cinq anticorps pendant 15 min dans l'obscurité à température ambiante selon le protocole du fabricant. Après l'incubation, 1 ml de tampon de lyse FACS a été ajouté à tous les tubes et a ensuite été incubé pendant 5 minutes dans l'obscurité à température ambiante. Pour arrêter la synthèse des cellules, 1 ml de PBS a été ajouté à chaque tube immédiatement après l'incubation. Tous les tubes ont ensuite été centrifugés à 1 500 tr/min pendant 5 min et les cellules ont été remises en suspension dans 500 µl de tampon FACS et conservées à 4°C.

Les cellules colorées ont été acquises à l'aide de LSR II (BD Biosciences) et le logiciel Diva a été utilisé pour l'analyse. Grâce à l'utilisation de la diffusion directe et latérale, la population lymphocytaire a été contrôlée sur une faible diffusion latérale et sur une population CD45 brillante lors de l'acquisition des 50 000 événements contrôlés. La population de cellules NK a ensuite été identifiée comme étant des cellules (CD3 négatives, CD 2, CD56C et CD7 positives). Le pourcentage de cellules T et de cellules NK provenant de la porte lymphocytaire a été obtenu pour l'analyse finale.

Analyses statistiques
Dans cette population, c'est-à-dire les femmes présentant des infections persistantes au VPH, l'éradication ou la disparition attendue de l'infection au VPH à elle seule est de zéro à 10 %. Le taux de réussite cible basé sur les données de l'étude pilote était de 50 % 6 mois après la fin de la supplémentation en AHCC et 12 mois après la fin de la supplémentation. Sur la base de ces proportions, une clairance de 10 % en l'absence de supplémentation et une clairance de 50 % avec supplémentation, une analyse de puissance a été réalisée à l'aide d'une simulation de données dans Mplus 7.2 via un processus en plusieurs étapes (17). La différence proportionnelle devait être observée entre le groupe d'intervention de supplémentation en AHCC 1 et le groupe témoin placebo 2 à la fin des 6 mois après le traitement. À un niveau de confiance de 0,05, un échantillon d'un maximum de 50 patients (N = 25 par groupe) a une puissance de 94,5 % pour détecter l'effet de l'intervention de l'étude. Les caractéristiques de base des patients par groupe d'étude ont été comparées à l'aide du test du chi carré pour les variables catégorielles et du test de Student pour les variables continues. Le test de Mann-Whitney a été utilisé pour évaluer les différences dans les taux de réponse en fonction de la durabilité de la réponse au VPH (NR, PR et CR) entre les groupes d'étude ayant répondu et ceux qui n'ont pas répondu. L'analyse du test t de Student a été utilisée pour évaluer les différences entre les marqueurs immunitaires entre la supplémentation en AHCC et les interventions placebo. Toutes les analyses ont été réalisées avec le logiciel SPSS (version 24) (IBM, New York, NY, USA). Toutes les valeurs p étaient bilatérales, les valeurs p inférieures à 0,05 étant considérées comme significatives.

Résultats
Cinquante femmes atteintes de HR-HPV ont été inscrites à cette étude et 41 ont terminé l'étude (Figure 2). Tous les patients présentaient une infection à HPV à haut risque confirmée depuis plus de 2 ans et ont été confirmés à nouveau au moment de l'inscription. Les patients du bras placebo et de la supplémentation en AHCC étaient similaires en termes d'âge, de race/origine ethnique, d'indice de masse corporelle (IMC), de nombre de partenaires sexuels antérieurs et de nombre de partenaires actuels au cours de l'étude. Les informations démographiques des patients sont résumées dans le tableau 2. Quatorze (63,6 %) des 22 patients du bras de supplémentation en AHCC étaient négatifs pour l'ARN du VPH/l'ADN du VPH après 6 mois. Neuf des 14 (64,3 %) patients étaient toujours négatifs pour le VPH avec les méthodes de dosage de l'ARN du VPH et de l'ADN du VPH 12 mois après l'arrêt de la supplémentation en AHCC. Deux des 14 (14,3 %) patients étaient positifs au VPH avec les méthodes de dosage de l'ARN du VPH et de l'ADN du VPH après l'arrêt de l'AHCC à 12 mois. Huit des 22 (36,3 %) patients du bras AHCC étaient positifs pour le VPH avec les méthodes de dosage de l'ARN du VPH et de l'ADN du VPH après 6 mois de supplémentation en AHCC. Dans le groupe placebo, deux (10,5 %) des 19 patients étaient négatifs pour le VPH à 12 mois. Dix-sept (89,5 %) patients restaient positifs au VPH au bout de 12 mois. Douze patients ont terminé l?étude sans insu et 50 % (n = 6) étaient négatifs pour l?ARN/ADN du VPH après 6 mois de supplémentation en AHCC. La combinaison des 34 patients ayant reçu une supplémentation en AHCC donne un taux de réponse global de 58,8 % qui a éliminé les infections persistantes au VPH. Ces résultats sont résumés dans le tableau 3. Tous les patients ont été inclus dans l'analyse de sécurité pour comparer le profil de toxicité de la supplémentation en AHCC par rapport au placebo. Aucun patient n'a signalé un grade supérieur à 1 (Critères de terminologie communs pour les événements indésirables (CTCAE) V5.0, 2018) avec le placebo ou la supplémentation en AHCC, et les événements indésirables ont été résolus au cours du premier mois de l'étude. Aucun patient n'a arrêté l'étude en raison d'événements indésirables. Le profil de toxicité de la supplémentation en AHCC était comparable à celui du placebo (Tableau 4).

Les tests ELISA et l'analyse du flux des lymphocytes totaux et des cellules NK effectués sur des échantillons de plasma à différents moments provenant de 41 patients ayant terminé l'étude ont montré que la suppression de l'IFN-? à moins de 20 pg/ml était corrélée à une augmentation des lymphocytes T et de l'IFN-?. et l'élimination des infections au VPH chez les femmes ayant reçu une supplémentation en AHCC. Le pourcentage moyen de changement des lymphocytes T par rapport au départ était compris entre 25 % et 45 % chez les répondants complets, ce qui était statistiquement significatif. Il y a eu une augmentation moyenne de 45 % du nombre de lymphocytes T à 6 mois chez les répondeurs complets et partiels, alors que les non-répondeurs et les patients sous placebo n'ont pas montré de changement significatif dans les lymphocytes T. Le pourcentage de changement moyen dans les cellules NK était inférieur à 10 % par rapport à la ligne de base et n'était pas statistiquement significatif dans tous les groupes.

Discussion
Il s'agit de la première étude clinique en double aveugle contrôlée par placebo démontrant que le supplément nutritionnel, AHCC, est efficace pour éliminer les infections persistantes à haut risque par le VPH avec une réponse durable chez les patients ayant atteint un taux d'IFN-? inférieur à 20 pg/ ml. Dans l?ensemble, l?AHCC a été bien toléré et a eu des effets indésirables comparables à ceux du placebo.

Actuellement, il existe peu d'options efficaces pour éliminer les infections persistantes à HR-HPV, et la plupart impliquent des procédures invasives ou des traitements topiques locaux qui n'empêchent pas nécessairement le virus HPV de revenir à cet endroit ou dans d'autres zones potentiellement infectées du corps telles que l'anus. ou épithélium infecté de la tête et du cou. Heureusement, la plupart des patients dotés d?un système immunitaire sain élimineront d?eux-mêmes les infections à haut risque par le VPH en 6 à 18 mois, sans aucune intervention (16, 18). Seulement environ 10 % des patients souffrent généralement d?infections persistantes au VPH (16, 18). Il n?existe aucune autre intervention systémique dont il a été prouvé qu?elle apporte une réponse durable pour éliminer les infections persistantes au VPH.

AHCC est un extrait exclusif et standardisé de mycéliums de lentinula edodes cultivés (AHCC®, Amino Up, Ltd., Sapporo, Japon) ; le composé est principalement composé de composants ?-glucane, contrairement à la plupart des extraits de champignons, qui sont composés de composants ?-glucane. L'AHCC présente une modulation immunitaire unique pour réguler négativement le niveau d'IFN-? hyper-stimulé, ce qui entraîne une rétroaction négative pour relancer la libération d'IFN-? et de lymphocytes T nécessaires à l'élimination des infections virales chroniques (17). Cette réinitialisation de l'immunité de l'hôte a été démontrée dans deux études indépendantes menées par Wilson et ses collègues et Teijaro et ses collègues, qui ont évalué les infections persistantes par le virus de la chorioméningite lymphocytaire (LCMV) et ont démontré que la suppression de la signalisation chronique de l'IFN-? peut réinitialiser l'immunité de l'hôte et permettre le contrôle. et l'élimination des infections virales persistantes (19, 20). En général, les extraits de champignons ?-glucanes sont des stimulants immunitaires de la voie IFN-?, qui sont utiles pour soutenir le système immunitaire dans les infections aiguës, mais pas autant dans les infections virales chroniques. Auparavant, Gao et ses collègues avaient démontré les effets immunomodulateurs de l'AHCC dans une étude montrant une activation accrue de l'antigène (Ag) des cellules T CD4 (+) et CD8 (+) ainsi qu'une augmentation des cellules NK (10). De plus, Roopngam et ses collègues ont démontré que les ?-glucanes des polysaccharides du pleurote gris (Pleurotus sajor-caju) ont une puissante activité immunomodulatrice (21). L'immunomodulation d'un polysaccharide de champignon améliore l'expansion des cellules T CD+/CD8+ (21). Les données de cette étude clinique ont également montré une augmentation significative des lymphocytes T chez les patients du groupe de supplémentation en AHCC.

Le système immunitaire humain commence à s?affaiblir vers l?âge de 25 ans, ce qui pourrait peut-être expliquer pourquoi les infections persistantes au VPH sont le plus souvent observées chez les femmes de plus de 30 ans ou souffrant d?autres maladies immunosuppressives.

Cette étude de phase II a confirmé les résultats des deux études pilotes précédentes qui démontraient que la supplémentation en AHCC modulerait le système immunitaire de l'hôte pour éliminer les infections persistantes à haut risque par le VPH (14). Même si cela n?aide pas tous les patients, en l?absence d?autres traitements systémiques, les cliniciens peuvent recommander l?AHCC, un complément nutritionnel facilement disponible qui offre de bonnes chances d?éliminer les infections persistantes au VPH.

Auparavant, les deux études pilotes évaluant la supplémentation en AHCC chez les femmes présentant des infections persistantes au HR-HPV ont identifié que des taux d'IFN-? inférieurs à 20 pg/ml étaient en corrélation avec l'élimination du HR-HPV (17). Cette étude de phase II a confirmé la corrélation entre la suppression des taux d'IFN-? à moins de 20 pg/ml avec une augmentation des lymphocytes T et de l'IFN-?, ce qui a finalement abouti à l'élimination des infections par le VPH chez les femmes ayant reçu une supplémentation en AHCC. Chez les patients qui étaient négatifs pour l'ARN du VPH/l'ADN du VPH après 6 mois de supplémentation en AHCC mais qui avaient un taux moyen d'IFN-? supérieur à 20 pg/ml, deux sont restés négatifs pour l'ARN du VPH mais positifs pour l'ADN du VPH, et trois étaient à la fois ARN du VPH et HPV. ADN positif 3 mois plus tard après l?arrêt de la supplémentation. Cela a identifié l'opportunité de recherches futures pour optimiser et personnaliser la durée de la supplémentation en fonction du statut d'infection au VPH et du niveau cible d'IFN-?. En outre, les données de cette étude ont identifié l?opportunité potentielle de recourir à la surveillance des niveaux d?IFN-?, qui pourrait être utilisée à la fois pour les hommes et les femmes infectés par le VPH. Bien que cette étude se soit concentrée sur les femmes infectées par le HR-HPV, en l'absence d'outils de test efficaces pour le statut HPV chez les hommes et avec un profil d'innocuité comparable à celui du placebo, l'utilisation d'une supplémentation en AHCC pour les hommes ayant une exposition connue au HR-HPV (c'est-à-dire , partenaires de femmes atteintes du HR-HPV) ainsi que celles atteintes d'une infection au LR-HPV pourraient envisager une supplémentation en AHCC pour éliminer l'infection au HPV.

Cette étude de phase II a été soutenue par des études précliniques in vitro, des études in vivo sur des animaux et deux études pilotes qui ont déterminé le mécanisme d'action et confirmé les avantages de la supplémentation en AHCC pour éliminer les infections persistantes au VPH. La plus grande force de cette étude réside dans le fait que même si l?AHCC n?est pas une intervention médicamenteuse traditionnelle, les avantages de la supplémentation en AHCC ont été soumis au test d?efficacité traditionnel d?un essai randomisé en double aveugle contrôlé par placebo. Contrairement à de nombreuses études sur les suppléments nutritionnels, cette étude a examiné des marqueurs immunitaires spécifiques pour confirmer le mécanisme de modulation par l'AHCC de la fonction immunitaire de l'hôte. En raison de ressources financières limitées, cette étude n'a pas pu explorer tous les mécanismes possibles de modulation immunitaire qui auraient pu favoriser l'élimination des infections persistantes au VPH. Étant donné que l?hypothèse des bénéfices de l?AHCC repose sur la modulation de la fonction immunitaire de l?hôte, le typage spécifique du VPH n?a pas été inclus dans cette étude, qui devra être évalué de plus près dans les études futures.

En conclusion, les résultats de cette étude de phase II ont démontré qu'AHCC 3 g une fois par jour était efficace pour aider le système immunitaire de l'hôte à éliminer les infections persistantes au VPH et était bien toléré sans aucun effet secondaire indésirable significatif signalé. La durée de la supplémentation en AHCC requise au-delà du premier résultat négatif nécessite une évaluation plus approfondie pour optimiser les résultats durables en fonction à la fois du statut d'infection au VPH et du niveau cible d'IFN-?.

Déclaration de disponibilité des données
Les contributions originales présentées dans l'étude sont incluses dans l'article/les documents supplémentaires. De plus amples renseignements peuvent être adressés à l'auteur correspondant.

Déclaration d'éthique
Les études impliquant des participants humains ont été examinées et approuvées par le comité d'examen institutionnel du centre des sciences de la santé de l'Université du Texas. Les patients/participants ont fourni leur consentement éclairé écrit pour participer à cette étude. Un consentement éclairé écrit a été obtenu de la ou des personnes pour la publication de toute image ou donnée potentiellement identifiable incluse dans cet article.

Contributions d'auteur
JS a été chercheur principal de l'essai clinique et était responsable du concept de l'étude, de la conception du protocole, de l'analyse des données, de l'interprétation clinique des données, de la rédaction et de la finalisation du manuscrit. AG, LM et BR ont servi de principale équipe de recherche responsable du dépistage des patients, des visites cliniques, du prélèvement d'échantillons et de l'analyse et ont participé à la rédaction et à la révision du manuscrit. JF a servi de collaborateur clinique dans cette étude et a participé à la conception du protocole, à l'interprétation clinique des données et à la révision finale du manuscrit. JL a servi de collaborateur clinique dans cette étude et a participé à l'interprétation clinique des données et à la révision finale du manuscrit. YB a servi de collaborateur de recherche participant à l?interprétation de l?échantillon d?analyse, à la conception du protocole et à l?examen du manuscrit final. RO a servi de collaborateur de recherche participant à l?interprétation de l?échantillon d?analyse et aux implications pour les futurs tests de surveillance. J'ai participé à la révision et à la finalisation du manuscrit. TB a servi de collaborateur clinique dans cette étude et a participé à la conception du protocole, à l'interprétation clinique des données et à la révision finale du manuscrit. Tous les auteurs répertoriés ont apporté une contribution substantielle, directe et intellectuelle à l?ouvrage et ont approuvé sa publication.

Financement
Cette étude a été financée par le programme de petites subventions NIH-NCI pour la recherche sur le cancer (1R03CA212935), qui n'a pas participé à la conception de l'étude, à la collecte de données, à l'analyse des données et à l'interprétation ou à la rédaction du manuscrit ou de sa publication.

Conflit d'intérêt
JS a reçu diverses subventions de recherche sans restriction soutenant des études précliniques sur l'AHCC avant 2014 d'Amino Up, Ltd.

Les autres auteurs déclarent que la recherche a été menée en l?absence de toute relation commerciale ou financière pouvant être considérée comme un conflit d?intérêts potentiel.

Note de l'éditeur
Toutes les réclamations exprimées dans cet article sont uniquement celles des auteurs et ne représentent pas nécessairement celles de leurs organisations affiliées, ni celles de l'éditeur, des éditeurs et des critiques. Tout produit pouvant être évalué dans cet article, ou toute réclamation pouvant être faite par son fabricant, n'est ni garanti ni approuvé par l'éditeur.

Remerciements
Les résultats finaux de l?étude seront présentés sous forme de présentation orale lors de la réunion virtuelle de l?Association centrale d?obstétrique et de gynécologie, le 7 novembre 2020, et sont les récipiendaires du prix « Dr. Prix du papier commémoratif George W. Morley.

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